처리 방법: 스펙트럼 분석: MS 스펙트럼 디콘볼루션

참고

스펙트럼 디콘볼루션에 대해 LC/MS 스펙트럼 디콘볼루션 분석법 구성을 사용합니다. 스펙트럼 디콘볼루션 분석법 파라미터는 스펙트럼 분석 > MS 스펙트럼 디콘볼루션에 있습니다.

이러한 파라미터는 디콘볼루션 알고리즘에서 관련 이온을 찾아 그룹화하고, 전하를 계산하고, 분자량을 계산하는 데 사용됩니다. 고분자량 화합물과 저분자량 화합물을 모두 포함하려면 기본 설정을 사용합니다. 개별 시료의 경우 일부 설정을 변경할 수 있습니다.

자동 디콘볼루션

자동 디콘볼루션 실행	각 데이터 처리 중에 자동으로 디콘볼루션을 실행하려면 이 확인란을 선택합니다.
RT 창 사용	선택 사항: 머무름 시간 창을 선택합니다. 자동 디콘볼루션은 지정된 시간 내에 있는 TIC 피크의 스펙트럼에 대해서만 실행됩니다.
TIC 피크 유형	TIC SCAN 신호에서 사용해야 하는 피크 유형 자동 디콘볼루션을 선택합니다. 식별된 피크: 화합물 테이블에 정의된 피크(처리 방법의 화합물 > 식별 노드)만 자동 디콘볼루션에 사용됩니다. 식별되지 않은 피크: 화합물 테이블에 나열되지 않은 피크(처리 방법의 화합물 > 식별 노드)만 자동 디콘볼루션에 사용됩니다. 모든 피크: 식별된 피크와 식별되지 않은 피크가 모두 자동 디콘볼루션에 사용됩니다.
TIC 피크 임계값	TIC SCAN 신호에서 피크를 필터링하는 방법을 선택합니다. 없음: 필터링 없이 MS 크로마토그램의 모든 피크에 대해 디콘볼루션이 수행됩니다. 상위 (n)개 피크: MS 크로마토그램에서 피크 높이별로 지정된 수의 가장 큰 피크에 대해 디콘볼루션을 수행합니다. 피크 높이 MS 크로마토그램에서 피크 높이가 지정된 값 이상인 모든 피크에 대해 디콘볼루션을 수행합니다. 피크 면적: MS 크로마토그램에서 피크 면적이 지정된 값 이상인 모든 피크에 대해 디콘볼루션이 수행됩니다.

첨가 생성물

이 콤보 상자에는 일반적인 양과 음인 첨가 생성물 이온이 나열됩니다. 선택 이온은 다중 하전된 스펙트럼을 생성하는 데 사용되는 첨가 생성물 이온을 보상하기 위해 디콘볼루션 중에 사용됩니다.

양 또는 음인 첨가 생성물을 추가하려면 해당 입력 필드에 해당 화학식을 입력하고 +를 클릭합니다. 목록에서 첨가 생성물을 삭제하려면 해당 첨가 생성물을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 삭제를 선택합니다.

기본 설정

m/z 범위 사용	특정 m/z 범위에서 스펙트럼 디콘볼루션 결과를 보려면 이 확인란을 선택합니다. 이 확인란을 선택하면 이 m/z 범위를 설정한 필드가 활성화됩니다. 디콘볼루션을 실행하면 MS 스펙트럼 창에 m/z 범위가 밝은 회색으로 표시됩니다.
저분자량	디콘볼루션에서 보고할 최저 분자량을 설정합니다. 기본값은 500amu입니다.
고분자량	최고 분자량을 설정합니다. 기본값은 50,000amu입니다.
최대 전하	최대 전하가 반드시 전하 할당에 대한 절대적인 컷오프를 나타내는 것은 아닙니다. 단지 관련 피크를 검색하는 데 사용되는 피크에 적용될 수 있는 가장 큰 전하를 나타냅니다. 예를 들어 최대 전하가 30이고 관련 피크를 검색할 때 피크 A에 전하 30을 적용하면 피크 A는 전하 27~29 및 31~33을 가진 관련 이웃을 찾습니다. 전하가 31~33인 피크는 단순히 최대 전하가 30이기 때문에 무시되지 않습니다. 그러나 관련 피크를 검색할 때 30을 초과하는 전하 상태는 피크 A에 적용되지 않습니다. 최대 전하(50) 및 최소 피크 세트(3)의 기본값은 고분자량 및 저분자량 화합물을 모두 찾을 수 있도록 설정되어 있습니다. 피크가 많은 스펙트럼이 있고 세트 내 최소 피크 수를 3의 값으로 설정한 경우 이러한 기본값을 사용할 때 주의해야 합니다. 이러한 조건에서는 알고리즘이 2개 또는 3개의 피크가 있는 추가 성분을 쉽게 찾을 수 있습니다. 알고리즘을 제한하려면 세트 내 최소 피크가 3일 때 최대 전하를 낮춥니다. 피크가 2개 또는 3개만 있는 성분은 일반적으로 분자량이 낮으므로 더 낮은 전하 범위가 적절합니다. 예를 들어, m/z 값이 약 1500인 피크의 전하가 30이면 분자량이 45,000에 가까워집니다. 따라서 분자량이 45,000 이하인 화합물의 경우 최대 전하를 30으로 변경하면 충분합니다. 고분자량 화합물을 찾기 위해 더 높은 최대 전하가 필요한 경우, 세트 내 최소 피크를 4 이상으로 변경합니다. 고분자량 화합물은 일반적으로 여러 개의 피크를 가진 성분을 가지고 있습니다. 다른 방법은 저분자량 및 고분자량을 사용하여 디콘볼루션이 보고할 질량 범위를 제한하는 것입니다. 저분자량 및 고분자량을 사용하는 경우에도 최대 전하를 적절한 값으로 설정하는 것이 좋습니다.
세트 내 최소 피크	이 파라미터는 이온이 세트로 간주되어 원래 스펙트럼에서 분리되기 전에 필요한 관련 이온의 최소 개수입니다. 기본값 및 최소값은 3입니다. 이 값을 늘리면 많은 이온이 포함된 스펙트럼에서 발견되는 성분을 제한하는 데 도움이 될 수 있습니다. 최소 이온 수가 3인 경우 전하 상태가 +1 및 +2 또는 -1 및 -2, +2 및 +3 또는 -2 및 -3, +3 및 +4 또는 -3 및 -4, +1 또는 -1만 및 +2 또는 -2만(이온 폭이 <= 0.4인 경우에만) 세트인 이온을 특별히 처리할 수 있습니다. MW 일치, 동위 원소의 존재, 동위 원소 간격, 동위 원소 비율 및 피크 폭은 낮은 전하 할당에 사용됩니다.
불일치 피크 표시	이 확인란을 선택하면 관련 이온 그룹에 속하지 않는 데이터 포인트가 중간체 결과에 개체로 포함됩니다. 기본적으로 이 확인란은 선택 취소되어 있으며, 즉 일치하는 피크만 포함됩니다. 일치하지 않는 피크를 살펴보면 감지되지 않은 작은 다중 전하 계열의 존재에 대한 단서를 얻을 수 있습니다.

고급 설정

MW 일치(0.01%)	전하 상태에 따라 이동한 이온의 분자량이 서로 얼마나 밀접하게 일치해야 하는지를 결정합니다. 값은 정수로 입력되지만 0.01%로 표시됩니다. 따라서 범위는 0~100(즉, 0~1%)이며 기본값은 5(0.05%)입니다. 값이 낮을수록 이온의 분자량이 더 밀접하게 일치해야 합니다. 값이 클수록 이온이 평균 분자량에서 더 멀어질 수 있음을 의미합니다. 0 값은 이온이 정확히 일치해야 함을 의미합니다. 0이 아닌 낮은 값일수록 데이터에 유효한 성분을 결정할 때 제한이 더 엄격해집니다.
절대 노이즈 임계값	상대 상대 존재비 임계값(%)과 절대 절대 노이즈 임계값 중 큰 값이 성분에 대한 관련 이온을 찾는 데 사용되는 이온을 결정합니다. 작은 신호를 검사하려면 절대 노이즈 임계값을 사용합니다. 기본값은 1000입니다. 범위는 0~1,000,000입니다.
상대 존재비 임계값(%)	이 파라미터의 값은 스펙트럼에서 가장 큰 이온의 존재비의 백분율을 나타냅니다. 존재비가 정확도를 초과하는 모든 이온은 세트의 다른 이온을 예측하는 데 사용할 수 있습니다. 기본값은 10%입니다. 상대 상대 존재비 임계값(%)과 절대 노이즈 임계값 중 큰 값에 따라 성분의 관련 이온을 찾는 데 사용되는 이온이 결정됩니다. 절대 노이즈 임계값은 큰 신호를 검사할 때 특히 유용하며, 작은 신호의 경우 이 값을 낮추는 것이 좋습니다. 이 값은 스펙트럼의 이온이 관련 이온 세트에 포함되는 것을 막는 것이 아니라 작은 이온이 세트의 다른 이온을 예측하는 데 사용되는 것을 방지할 뿐입니다.
MW 알고리즘	분자량을 결정하는 데 사용되는 알고리즘을 선택합니다. 기본값은 곡선 피팅으로, 이온 세트의 분포가 가우시안이거나 동위원소 분리능을 가질 때 최상의 결과를 제공합니다. 중심은 MW 알고리즘 임계값(%)을 초과하는 데이터 포인트의 가중 평균을 제공합니다.
MW 알고리즘 임계값(%)	결과적으로 재구성된 질량 엔벨로프에서 분자량을 찾는 데 사용할 부분을 결정합니다. 이 값은 엔벨로프에서 가장 높은 존재비의 백분율을 나타냅니다. 이 존재비 임계값을 초과하는 데이터 포인트는 분자량을 결정하는 데 사용됩니다. 기본값은 40%입니다. 데이터에 노이즈가 있거나 "최종" 피크가 매우 비대칭인 경우 이 파라미터를 높여 엔벨로프 베이스 근처의 엔벨로프 비대칭 부분이 MW 계산에 사용되지 않도록 할 수 있습니다. 이 값을 너무 높게 설정하면 곡선 피팅에 소수의 데이터 포인트만 사용되므로 곡선 맞춤이 실패할 수 있습니다. 곡선 피팅에 실패하면 낮은 전하 상태 또는 노이즈가 많은 데이터에 대해 MW 알고리즘 파라미터 중심을 사용해 보십시오. 그렇지 않으면 MW 알고리즘 임계값(%)을 낮춰 보십시오. 알고리즘은 가장 큰 이온의 최대값에서 시작하여 데이터 포인트를 따라 이온 피크의 전면을 따라 할당된 컷오프를 향해 내려갑니다. 하사면에서 10% 이상 상승하는 분리되거나 분리되지 않은 동위 원소를 발견하면 알고리즘은 이온 피크를 가로질러 다시 상승하기 전의 저점에서 저점의 바로 맞은편에 있는 후행 가장자리의 지점까지 컷오프 선을 그립니다.
엔벨로프 임계값(%)	알고리즘이 이온 그룹을 성분으로 받아들이기 전에 이온 그룹의 형태가 가우시안 형태와 얼마나 엄격하게 일치해야 하는지를 결정합니다. 범위는 0~100%입니다. 0은 엔벨로프 형태가 적용되지 않음을 의미합니다. 숫자가 높을수록 형태 적용이 더 엄격해집니다. 기본값은 50이며, 이는 엔벨로프의 위쪽 기울기에 있는 이온의 존재비가 왼쪽에 있는 이온의 존재비의 50%보다 낮을 수 없음을 의미합니다. 또한 엔벨로프의 아래쪽 기울기에 있는 이온의 존재비가 오른쪽에 있는 이온의 50% 이상일 수 있음을 의미합니다.