Depois que os picos tiverem sido integrados e identificados, a próxima etapa na análise quantitativa é a calibração. A quantidade e a resposta raramente têm proporção direta com a massa real da amostra a ser analisada. Isso torna necessária a calibração com materiais de referência. A quantificação utiliza a área ou altura do pico para determinar a quantidade de um composto em uma amostra.
Uma análise quantitativa envolve muitas etapas que estão brevemente resumidas a seguir:
Conheça o composto que você está analisando.
Estabeleça um método para analisar amostras contendo uma quantidade conhecida desse composto, que é chamada amostra ou padrão de calibração.
Analise a amostra de calibração para obter a resposta devida para aquela quantidade.
Como alternativa, você pode analisar uma série desses padrões com diferentes quantidades dos compostos de interesse se o seu detector tiver uma resposta não linear. Esse processo é denominado calibração multinível.
Você pode realizar a quantificação com os seguintes métodos de calibração:
Calibração específica de um composto (ESTD, ISTD)
Quantificação indireta usando fator de resposta ou calibração de outro composto ou grupo
Fator de resposta fixo (Fator manual)
Os cálculos e as curvas de calibração ESTD são baseados em respostas medidas (área ou altura) de determinadas quantidades. Os cálculos e as curvas de calibração ISTD são baseados em respostas relativas e quantidades relativas (consulte Respostas relativas com ISTD).