A verificação de impureza de pico é um recurso 3D-UV do OpenLab CDS que permite verificar se os picos podem ser considerados puros (sem impureza por baixo) ou impuros, caso haja alguma impureza ao longo do pico absorvendo nos comprimentos de onda UV definidos.
É usada uma porcentagem de sensibilidade para ajustar o threshold de pureza de espectros para o instrumento ou aplicação considerado. O resultado é altamente dependente de ruído, da coluna, do solvente, da matriz etc. Portanto, o fator de correspondência encontrado deve sempre ser revisado por um químico.
Para verificar impurezas UV:
Analise um padrão puro que contenha os compostos de interesse.
Dependendo do tipo de amostras e de sua aplicação, você pode escolher o pico de um branco com compostos padrão puros.
Faça um cálculo de verificação de impurezas nesse padrão.
Em comparação ao ChemStation, há um conjunto simplificado de parâmetros. Você apenas precisa adaptar a sensibilidade (globalmente ou por composto) para que os picos de interesse seja mostrados como puros. A sensibilidade basicamente desloca a curva do threshold para cima ou para baixo.
Adapte a sensibilidade e verifique a curva da razão de pureza na janela Detalhes do pico.
Use esse método de processamento para analisar suas amostras.
Observe que uma verificação de impureza UV tem seus limites e sempre precisa ser avaliada por um químico. |
Qualquer funcionalidade de espectros possui dependências com a precisão do instrumento, assim como com a aplicação cromatográfica e o seu modo de processar os dados. Aqui encontram-se exemplos de parâmetros que influenciam quando se computa a pureza de um pico UV:
A razão sinal/ruído é um parâmetro genérico influenciado por muitas variáveis do sistema. Como uma observação genérica, quanto mais baixa for a razão sinal/ruído, mais alta será a contribuição do ruído. A pureza de pico considera e recupera o ruído do início e do final do pico. No entanto, com uma razão sinal/ruído baixa (por exemplo, inferior ao limite de detecção), o cálculo de ruído se torna difícil e pode gerar resultados de pureza de pico flutuantes. Um efeito oposto pode ser observado ao trabalhar com uma concentração muito alta, atingindo o limite de intervalo superior do detector. Neste caso, a absorbância dos componentes irá flutuar e a pureza de pico não será exata.
Saúde e manutenção do instrumento: Precisão da bomba, degaseificador de solvente, carryover do injetor, sangramento da coluna e linearidade do detector são fatores que influenciam a análise espectral.
Limite e qualidade do solvente: Todo fabricante de solvente fornece as especificações de UV do lote de solvente adquirido. Este limite do solvente precisa ser considerado na largura de banda de comprimento de onda usada para o cálculo da pureza de espectros, especialmente quando se trabalha com um gradiente de solvente.
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Parâmetro | Valores padrão recomendados |
Comentários |
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Sensibilidade | 50% para instrumento convencional, regularmente mantido ou novo, após verificação do instrumento 75% para cromatografia de última geração | Diminua entre 10 a 20% o valor padrão para cada um dos seguintes pontos não cumpridos:
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Largura de banda de comprimento de onda | De acordo com o limite do solvente (L0 + 5 nm) De acordo com as absorções de espectros de compostos (se conhecidas) | Por exemplo, paracetamol em acetonitrila/água: 205–300 nm |