Realizar o tune do MS manualmente (LC/MS)
O programa de Tune Automático ajusta o MS para um bom desempenho por todo o intervalo de massas. Para muitos aplicativos, você não precisa usar qualquer outra coisa. Você pode considerar realizar o tune manualmente o MS nas seguintes situações:
- Atingir sensibilidade máxima sacrificando uma certa resolução
- Ajustar especificamente para a extremidade inferior do intervalo de massas (< 150 amu)
- Ajustar com um composto diferente dos calibrantes padrão
Você só pode fazer o tune manual se o seu instrumento for um Agilent 61xxC. (por exemplo, 6125C, 6135C)
Modos de Ionização
Tune separado não é necessário para eletrospray, APCI/APPI e MMI-ESI+APCI. O tune resulta no ajuste dos parâmetros que controlam a transmissão de íons. Essas partes não conhecem nem se importam com o modo como esses íons são gerados. Um arquivo de tune criado em modo eletrospray muitas vezes fornece bons resultados para as amostras APCI/APPI. O oposto também acontece.
Polaridade
É necessário o tune separado para ionização positiva e negativa. O MS deve, em algum momento, realizar tune duas vezes, uma vez com íons positivos e uma vez com íons negativos. Os dois tunes podem ser armazenados com o mesmo nome do arquivo de tune; o software mantém as configurações de íons positivos e negativos separadas. As configurações de íons positivos e íons negativos podem ser atualizadas separadamente.
Intervalo de massa
O tune é quase sempre feito por todo o intervalo de massa. A exceção é se todos os íons de interesse forem menores do que aproximadamente 150 amu. O tune manual correto em um intervalo de massa reduzido pode melhorar a transmissão e detecção desses íons de massa muito baixa.
Frequência
Não é necessário realizar tune frequentemente. O MS é muito estável e pode passar semanas ou meses antes de precisar realizar o tune novamente.
Fonte de Íons
Você pode executar o tune manual com qualquer fonte. Se tem uma fonte MMI, a Agilent recomenda que você faça o tune em modo MMI-APCI com o calibrante de tune APCI. O calibrante de tune APCI não contém 118 m/z, que é necessário para fazer o tune em modo ESI.
Passos
Essa seção inclui instruções passo a passo para o tune manual do MS. As instruções assumem o uso de um dos calibrantes padrão e o tune por todo o intervalo de massa, mas podem ser alteradas para calibrantes fora do padrão ou para intervalos de massa mais limitados. Interações múltiplas, muitas vezes dependentes da massa entre diversos parâmetros, tornam o tune manual um processo complicado e iterativo. Essas instruções fornecem um bom ponto de partida, mas não são um substituto da experiência e familiaridade com os efeitos dos vários parâmetros e suas interações.
Os principais passos do tune manual são
- Preparar para o tune manual (LC/MS).
- Configurar parâmetros de aquisição e ajustar o eixo de massas
- Realizar Rampa do Fragmentador dinamicamente (LC/MS)
- Realizar Rampa das lentes durante o tune manual (LC/MS)
- Otimizar o Octapolo (LC/MS)
- Ajustar larguras do pico e eixo de massas (LC/MS)
- Otimizar os parâmetros da RF Lente2 (LC/MS)
- Clique em
para desbloquear o instrumento. Você precisa desbloquear o instrumento após terminar o tune.
Veja também
Realizar o tune do MS automaticamente (LC/MS)