要运行延迟校正，必须创建方法来确定要包含在已校正系统中的所有模块，并包含以下信息：
样品信息（位置、名称等）
每个模块的设置信息和运行（进样器、泵、检测器等）
延迟校正程序应在方法设置尽可能接近目标应用的情况下进行，以避免潜在问题。建议使用与目标应用相同的流量调节器设置（分流模式），以避免出现意外问题。如果在分流流量检测器的信号太小，必须将分流模式调整到更接近模式 1 的数值。
重要信息：在分流流量检测器上测量的延迟时间和体积只对该主流量和补偿气流量的组合有效。根据实际流速仅重新计算主流量中检测器的校正延迟时间和体积。
使用延迟和检验调谐液的校正不能等比例进行。在使用高百分比的有机溶剂时，混合物中的一些染料将不能从色谱柱中正确洗脱。这是使用高表面积色谱柱分离磺化染料的特殊效果，这在制备色谱中是很典型的。
在第一次运行前，使用 95% 有机通道 B 和三个色谱柱体积来冲洗色谱柱（约 2 分钟）。
下表列出了 Agilent 延迟和检验调谐液（部件号 5190-8223）在不同色谱柱直径下的建议默认进样量。如果需要，请调整进样量，以防检测器或馏分收集器延迟传感器的最终响应饱和或过低。
色谱柱内径 | 调谐液进样量 |
|---|---|
3.0 mm | 0.5 μL |
4.6 mm | 1 μL |
大约 10 mm | 10 μL |
大约 20 mm | 50 μL |
30 mm | 100 μL |
50 mm | 300 μL |
如果系统包含 1290 Infinity II 制备型开放式进样器/收集器 (G7158B)，请在进样器方法中将操作模式切换到制备。从方法预设列表中，选择非极性样品基质的预设。在右侧的塞子设置中，提供 25% 甲醇水样品瓶的位置，作为进样后的塞子溶剂。所有其他参数保持默认设置。
LC 系统在交付时至少有一个毛细管套件是为一定的流速范围设计的。根据所安装的毛细管，建议采用以下色谱柱和流速组合。
色谱柱内径 | 流速范围 | 随系统提供的色谱柱 |
|---|---|---|
3.0 mm | 0.4-0.6 mL/min | 3.0 × 50 mm，2.7 μm (699975-302) |
4.6 mm | 1.0-1.5 mL/min | 4.6 × 100 mm，2.7 μm (695975-902) |
大约 10 mm | 4-8 mL/min | 10 × 50 mm，5 μm (446905-802) |
大约 20 mm | 15-40 mL/min | 21.2 × 50 mm，5 μm (446905-702) |
30 mm | 40-80 mL/min | 30 × 50 mm，5 μm (446905-302) |
50 mm | 80-200 mL/min | 50 × 50 mm，5 μm (446905-502) |
如果雾化器前的管路系统中包含来自管路套件的被动分流，则建议的补偿气流量为 1.5 mL/min。
如果未使用来自管路套件的被动分流，则建议的补偿气流量应为 0.5 mL/min。ESI 源的最大流速为 0.8 mL/min。
以下梯度建议用于制备型系统毛细管套件中包含的 50 mm 长的色谱柱。如果使用更长的色谱柱进行校正，请将梯度的斜率时间延长适当的系数。该梯度适用于任何色谱柱内径，只要相应地调整流速即可。
时间 | 成分 A | 成分 B |
|---|---|---|
预处理时间：1.5 min | ||
0 min | 90% | 10% |
0.5 min | 90% | 10% |
4.0 min | 5% | 95% |
6.0 min | 5% | 95% |
6.1 min | 90% | 10% |
停止时间：7.0 min | ||
如果色谱图上出现尖峰或尖峰连成峰状带，可尝试将起始成分从 10% 增加到 20%。
UV | 使用 600 nm 的波长（无参比波长）来监测延迟和检验调谐液的蓝色校正染料。 |
MS | 蓝色校正染料的可见离子：
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