Calibração de atraso

No contexto de purificação de amostras, os usuários muitas vezes realizam a coleta de frações para fins analíticos ou preparativos. Com a coleta de frações, os compostos separados durante a corrida pelo processo cromatográfico são recuperados em tubos individuais.

Para garantir que a porção correta da amostra seja coletada, determine o tempo necessário para que um composto se desloque do detector até o coletor de frações: o Tempo de calibração de atraso ou o Tempo de atraso. Os atrasos (tempo ou volume) são calculados e armazenados no coletor de frações para serem usados posteriormente durante as corridas. Durante uma corrida, a coleta de frações começa no tempo de retenção do pico fornecido pelo detector mais o tempo de atraso.

  • Para detectores não MS (DET=UV, DAD, ELSD), um volume de atraso é calculado.

  • Para o detector MS, um tempo de atraso é calculado.

Volume de atraso para detectores não MS

Quando um detector não MS é usado (UV, DAD, ELSD), um volume de atraso é calculado. Ele representa o volume dos tubos entre o detector e o coletor de frações. É necessário executar a calibração de atraso para um sistema uma única vez. Somente será necessário realizar a calibração novamente se forem feitas alterações no instrumento, por exemplo, se o comprimento dos tubos tiver sido alterado.

Um método com fluxo constante é usado para executar uma corrida de calibração de atraso. No entanto, o gradiente de fluxo da bomba é suportado ao enviar corridas usando um método de coleta de frações. O volume de atraso calculado é convertido durante a corrida em um tempo de atraso de acordo com o fluxo atual da bomba (tempo de atraso = volume de atraso / fluxo da bomba).

Para obter mais informações sobre o volume de atraso, consulte Guia Avaliação.

Tempo de atraso para o detector MS

Quando um detector MS é usado (Quadruplo Simples), o volume de atraso não pode ser facilmente calculado, pois depende do fluxo da bomba principal, do fluxo da bomba makeup, da taxa de split e da bobina de atraso. Portanto, a ferramenta de Calibração de Atraso calcula o tempo de atraso. O tempo de atraso representa o tempo que um composto leva para se deslocar do detector MS até a válvula de desvio do Sensor de Atraso de Fração (o FDS é o detector básico localizado no módulo do coletor de frações).

O tempo de atraso é calibrado para uma configuração de instrumento dedicada (sem alteração nas tubulações) e também para um método de aquisição definido (fluxo da bomba, fluxo da bomba makeup, divisor). Se as tubulações ou o método usado para correr as amostras forem alterados, uma nova calibração deverá ser feita (iniciar uma nova corrida de calibração).

O gradiente de fluxo da bomba não é suportado.

Para obter mais informações sobre o tempo de atraso, consulte Guia Avaliação.

 

Para executar uma corrida de Calibração de Atraso, é necessário adquirir amostras de calibração dedicadas. Essas amostras contêm compostos que podem ser detectados por UV, MS e também pelo sensor de atraso do coletor de frações.

A Calibração de Atraso é dividida nas seguintes partes:

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